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免疫组化实验中,组织固定出问题了,还有办法补救吗?众所周知,免疫组化实验中组织固定是很关键的步骤之一,如果没固定好固定到位,就会出现非常多的问题,甚至直接导致最终的实验失败!那如果真的实验中没固定好组织,我们只能直接废掉重做吗?是不是还有什么补救的方法呢? 按照慧登生物多年的实验经验,针对免疫组化实验中组织固定不良问题,确实是还有点办法补救的,只是需要提前提醒一句的是:一旦组织固定不良,补救效果可能并不理想。所以,作为科研人员,不要一直想着出现问题补救,而是要在组织固定的过程中,就严格控制固定剂的浓度和固定时间等实验条件,以保证组织的良好固定效果。并且,此方法补救成功的可能性和技术人员的操作和经验有关,所以建议情况允许的话,可以交给专业的技术人员去操作! 免疫组化实验中,组织固定不良补救措施如下: 1、把已包埋的固定不良的组织重新放入石蜡中融蜡,使组织周围多余的蜡去除; 2、把已除去石蜡的组织放入二甲苯Ⅰ(或环保脱蜡剂)中30分钟,二甲苯Ⅱ30分钟,以去除组织内含有的石蜡; 3、把经过两道二甲苯的组织重新逐级放入乙醇; 4、无水乙醇Ⅰ→无水乙醇Ⅱ→95%乙醇→80%乙醇中各20分钟,此过程应注意各级乙醇应是初次使用,而且不可重复使用,以免已脱蜡的组织又重新沾上乙醇中含有的蜡; 5、如组织已干枯,应在以上程序后水化,应放1%~2%冰醋酸内使组织软化后重新水洗,水洗时间视标本大小确定; 6、把经过各级乙醇浸泡得组织重新放入70%甲醛乙醇溶液中固定; 7、把经过二次处理的组织和下一批标本一起放入脱水机内常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。 另外,慧登实验在免疫组化实验中,针对两个特殊组织的固定也有两个建议! 建议1、骨组织固定的时候,建议非特殊需要,不要使用酸性固定剂,因为这些固定剂会使骨组织加速膨胀,破坏骨组织结构的; 建议2、淋巴结如果取材的是厚度为0.2cm的组织块的话,建议是固定6小时后再制片,效果更好; 慧登生物,免疫组化实验经验丰富,如你有相关实验问题或需求,可以直接咨询慧登生物客服,24小时免费咨询! |
