烧伤烫伤(TI)小鼠模型的建模【动物实验外包】

SPF级Balb/C小鼠，健康，雄性，4~6W，体重为18g~20g。

实验分组：实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期：4-6 weeks

建模方法：

1. 烧伤造模过程：

戊巴比妥钠麻醉小鼠后，用剃毛器剃去小鼠背部毛，并使用硫化钠于背部进行脱毛处理至无毛。将小鼠四肢和尾部固定于超净台上，间隔排列，将水浸湿的带控制烧伤面积的纸片放在小鼠背部（2.0cm×3.5cm=7.0 cm2，占体表面积10％），用滴管滴加乙醇，浸满皮肤，打火机点燃，启动秒表计时，到时用湿布熄火，将小鼠放回鼠笼。需进行预实验确定合适的烧伤时间。

2. 烧伤后护理：

烧伤后当天，各组小鼠腹腔注射葡萄糖盐水0.3-0.4 mL，第2天灌胃牛奶0.2-0.3 mL。第3天，正常小鼠与烧伤小鼠各取1只处死，取材。治疗方式为：A、B组于伤口处涂抹药物，C组于伤口处均匀喷上喷剂。烧伤后7天内每天早晚各给药一次，厚度为1mm；第8天起每天给药一次。

3.取材：

于烧伤后2、7、14、30、45、60天分别处死A、B组各1只小鼠。处死小鼠之前，记录小鼠体重和创面的变化（拍大体照，尽可能每只鼠拍照的角度一致）。

取材：老鼠麻醉后摘眼球取血，提血清，置于-80度保存。烧伤创面分2份，一份置于福尔马林保存用于后期病理染色，另一份置于液氮快速冷冻置于-80度保存。

应用：疾病模型

模型评价：

皮肤观察：

观察伤处愈合情况，记录小鼠体重变化、创面愈合时间、感染情况、愈合后瘢痕情况，创面愈合率等，拍大体照，尽可能每只鼠拍照的角度一致。

组织病理学：

HE染色：对皮肤进行病理检查和观察：将烧伤创面连同周边皮肤约0.5 cm取下，平铺于滤纸上，然后固定于10％ 福尔马林内，纵向和横向切取宽约3-4 mm皮肤，按常规制备石蜡切片，切片厚度为5 μm，苏木素一伊红(HE)染色，用显微镜观察并照相。

IHC染色：取石蜡切片，进行Ki67染色。