在PCR实验室进行相关实验操作的时候，总会出现各种各样的问题，比如以下这些！
PCR实验室PCR常见问题一、无扩增条带
可能的原因：
酶失活或在反应体系中未加入酶。失活更换新酶或用另一来源的酶即可解决。
模板含有杂质。比如固定及石蜡包埋的组织就含有甲酸，这样就很有可能造成DNA脱嘌呤而影响PCR的结果，所以我们要先去除模板的杂质。
变性温度不准确。过高酶失活；过低则模板变性不彻底。
引物变质失效。
引物错误。可以利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。
DNA凝胶和PCR程序的问题。判断是否是因为这个问题导致的，可以在进行DNA凝胶电泳时加入阳性对照进行筛查等等。
PCR实验室PCR常见问题二、PCR产物量过少
可能的原因：
PCR实验室PCR常见问题三、扩增产物在凝胶中涂布或成片状条带弥散
可能的原因：
酶量过高。减少酶量；酶的质量差，调换另一来源的酶。
dNTP浓度过高。减少dNTP的浓度。
MgCl2浓度过高。可适当降低其用量。
模板量过多。
引物浓度不够优化。可与对引物进行梯度稀释重复PCR反应。
退火温度过低。
电泳体系有问题：凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大；凝胶没有凝固好；琼脂糖质量差。
PCR试剂盒有问题：运输储存不当引起试剂盒失效；试剂盒本身质量问题，如引物选择、循环参数等选择不当等等。
PCR实验室PCR常见问题四、扩增产物出现多条带 （杂带）
可能的原因：
引物用量偏大，引物的特异性不高。可以调换引物或降低引物的使用量。
循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。
酶的用量偏高或酶的质量不好，可以降低酶量或调换另一来源的酶。
退火温度偏低，退火及延伸时间偏长。
若为PCR试剂盒，也可能时试剂盒本身质量有问题。
反应缓冲液未完全融化或未充分混匀。确保反应缓冲液融化完全并彻底混匀。
引物特异性差。利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。
引物量过多。减少反应体系中引物的用量。
模板量过多。
外源DNA污染等等。
以上就是PCR实验室PCR我们常见的问题了，造成这问题出现的原因也做了详细的解释说明，还有任何疑问的，可直接咨询长沙生物实验室慧登生物客服，24小时在线免费咨询！
