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细胞培养实验中，我们如何正确操作来给细胞计数呢？在细胞培养实验中，有时，我们为了了解细胞的生长情况，总免不了要给细胞计数，那如何给细胞计数呢，计数前我们还有哪些问题要注意呢？ 下面慧登生物实验室就给大家说说在细胞培养实验中细胞计数的详细步骤的方法： 1、首先准备好细胞计数器(血球计数板)。 细胞培养实验开始计数前，我们要先使用70%乙醇将盖玻片和细胞计数板清洁、晾干备用，将晾干的盖玻片轻轻覆盖至血细胞计数器上。(慧登生物提醒：一定要保证盖玻片和计数板已充分晾干，不然对后续操作和实验结果会造成影响。) 2、制备细胞悬液。 对于贴壁生长的细胞，需要使用胰酶消化的方法使细胞从培养皿表面脱落，然后加入适当的含血清培养基，中和胰酶的作用并重悬细胞，以得到均质的细胞悬液。尽可能将细胞吹散，不要残留任何细胞团，但不可用力过大。 3、台盼兰染色。 在细胞培养实验中，如果需要计算细胞的活率，则需要将细胞悬液和0.4%台盼兰等体积混合;室温孵育3-5分钟(慧登生物提醒：悬浮细胞染色时间可视情况适当延长)，使台盼兰完全进入死细胞，使死细胞着蓝色。 4、血细胞计数器加样。 使用吸管或移液器将细胞悬液或细胞/台盼兰混合液滴加到计数池的边缘。此时液滴将在虹吸的作用下进入盖玻片下方的计数池，此即为充池。(慧登生物提醒：两侧都要加，并且若需进行多个样品的计数，应尽量保证每次充池的体积一致。) 5、细胞计数 在显微镜下，移动计数板将视野对准计数板的中央大方块，在细胞培养实验中，我们的计数原则为：“数上不数下，数左不数右”。多个细胞吹不散成团的即为一个计数。 好了，关于细胞培养实验的细胞计数问题就说到这了，大家还有疑问的，可直接咨询长沙生物实验室慧登生物的客服，24小时在线免费咨询！ |
