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pcr实验结果为什么总不对?原来是实验室里出了这个问题!

不少朋友说自己做在实验室做pcr实验时,实验结果总是达不到自己的预期,这到底是因为什么原因呢?


其实,根据慧登生物多年实验经验,影响pcr实验结果的原因主要是以下几种:引物的选择、酶及其浓度 、dNTP的质量与浓度、模板(靶基因)核酸、Mg2+浓度、温度与时间的设置、循环次数、设备、耗材等等。其中,实验室由于pcr耗材问题导致实验结果不理想的大有人在,所以选择合适的实验室pcr耗材就显得尤为重要了!


众所周知,pcr耗材类型很多,什么8连管,什么低容管,还分什么半裙边、全裙边的,类型太多,让人头晕,究竟我们选择什么样的耗材好呢?哪样的才更好的保障实验结果的准确性呢?在回答这些疑问之前,我们先清楚以下几个问题!


1、pcr耗材为什么一般都是PP材质的呢?


pcr实验室中,pcr/qpcr耗材一般都是聚丙烯(PP)材质,这是因为它是一种惰性材料,化学性能非常稳定的材料,不容易和其他物质发生化学反应,这样的话就能减少由于耗材材料的原因导致的实验结果偏差。


2、不同体积的pcr 管/板,该怎么选呢?


根据慧登生物多年实验经验,pcr实验室中,在满足实验要求的基础上,建议优先推荐选用低容管。因为低容反应管/板有着较小的上方空间,可提高热传导率并降低蒸发。而且在加样时,需要避免加样过量或过少。过量会导致热传导率下降,溢出及交叉污染,而加样过少可能会造成样品蒸发损失。


3、为什么pcr 管/板还有不同颜色的呢?


pcr实验室中,我们经常看到各种颜色的pcr管,这在普通的pcr实验中,你无论是选择透明的还是彩色的pcr管都是可以的,为什么会有彩色的,这是因为想更好的进行样品分类管理而已,选择哪种颜色,对我们最终的实验结果是没有太多影响的,这个大家是可以放心的。


但是对于qpcr实验,则还是更推荐选用优质的白色pcr耗材。这主要是由于qpcr需要实时定量检测荧光信号强度,更需要灵敏、精确的荧光信号传递,这时候白色透明的,可最大程度地反射荧光信号,减少孔间信号交叉污染,可优化实时荧光定量pcr的结果。


总的说来,pcr耗材还是根据实验按需选择就行。以上就是pcr实验室pcr耗材选择常见的问题了,还有任何疑问的,可直接咨询长沙生物实验室慧登生物客服,24小时在线免费咨询!




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