你做的细胞划痕实验老是失败？长沙细胞实验公司教你正确做法！

细胞划痕实验，因为其成本低并且操作简单的优势，是目前绝大多数长沙细胞实验公司用来检测细胞迁移能力的一种方法。

细胞划痕实验看似简单，以为画个线就可以了，但实际上，不少实验人员在这上面也栽了很多跟头，细胞铺板数量过多/过少、划痕不均一、细胞不迁移等等情况时有发生！那怎么操作才能获得我们想要的结果，怎么样做才是正确的呢？今天就跟着长沙细胞实验公司慧登生物一起来看看吧~

1、培养板划线标记

细胞划痕实验开始前，需要使用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀的划平行线（线要直），各水平线间的间距为0.5-1cm，每孔至少画5条水平线，方便之后镜下观察每个区域，长沙细胞实验公司慧登生物提醒：划线时注意线不要太粗。

2、细胞铺板

紧接着进行细胞划痕实验的第二步，胰酶消化细胞，制备细胞悬液。细胞计数后铺板，保证每组细胞铺板密度一致，一般在孔内接种约5-10×105个细胞（可根据细胞的生长快慢调整接种数量）。长沙细胞实验公司慧登生物提醒：一定要等到细胞铺满，彼此之间没有空隙，不然会影响后续数据分析。

3、制造划痕

待细胞铺满后，用直尺比着，使用20ul枪头垂直于孔板和线制造细胞划痕，使划痕与标记线相交。长沙细胞实验公司慧登生物提醒：进行细胞划痕实验的划痕步骤时，划痕的枪头一定要垂直，千万不要倾斜，力气也不要是大事小，这样容易影响后面的实验结果。

4、洗去划下的细胞，换液处理

细胞划痕实验的划痕完成后，用显微镜照相，作为0h对照。吸去旧培养基，再使用无菌PBS洗细胞3次，洗去划下的细胞，使留下的间隙肉眼即清晰可见。然后加入新鲜无血清或低血清（<2%）的培养基。根据需要设加实验组、对照组。不需加药的空白对照组只需添加等量的无血清培养基即可，药物干预组加入含药物的无血清培养基。长沙细胞实验公司慧登生物提醒：在用PBS缓冲液冲洗时，注意贴壁慢慢加入，以免冲散单层贴壁细胞。

5、细胞培养与定时拍照观察，并进行数据分析

最后，将细胞放入37℃，5%CO2培养箱中培养。然后在适当的时间点（根据个人实验需要）取出细胞，在显微镜下观察划痕宽度并拍照。长沙细胞实验公司慧登生物提醒：细胞划痕实验中，一般按0，6，12，24小时拍照，建议不要把观察时间设置的太长，因为很容易造成细胞污染死亡或者过度增殖造成的假阳性结果。

好了，关于细胞划痕实验的相关问题今天就说到这了，大家还有疑问的，可直接咨询长沙细胞实验公司慧登生物的客服，24小时在线免费咨询！