|
CCK-8实验这些问题怎么解决?细胞实验外包公司有好的推荐吗?大家都知道,目前很多的细胞外包实验公司做细胞增殖实验的时候,都会优先选择CCK-8这个方法,为什么呢?因为CCK-8它灵敏度高,无放射性安全,检测时间还短。但是问题来了,对于新手入门的我,CCK-8实验很多问题我没办法解决,实验做不下去啊,有好的能协助做的细胞实验外包公司的推荐吗? 首先说下细胞实验外包公司哪家好,哪家值得推荐的问题,在湖南长沙细胞实验外包公司里,慧登生物作为一家优秀靠谱的细胞实验外包公司,可以开展涵盖病理、分子生物、生化免疫、细胞、动物、理化、蛋白等多种项目,并且承诺只做100%真实实验,还是很值得推荐的! 再说说CCK-8法去做细胞增殖实验时,这些问题点怎么去解决!下面就和细胞实验外包公司慧登生物一起来学习下吧~ 1、一个孔中要接种多少个细胞合适? 当我们使用96孔板时,细胞实验外包公司慧登生物推荐,贴壁细胞的最低接种量不低于1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时候的灵敏度较低,所以建议接种量不少于2,500个/孔(100μl培养基)。可是如果你是用24孔板或6孔板做实验,细胞实验外包公司慧登生物提醒你,一定要注意先计算每孔相对应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液! 2、酚红会影响到检测吗? 细胞实验外包公司慧登生物告诉你:并不会。这是因为培养基中酚红的吸光度能够在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测产生影响。 3、CCK-8稳定吗? 还是比较稳定的,一般的话,CCK-8在0-5℃下可以储存起码6个月,在-20℃下避光可储存1年。如果有需要长时间保存,细胞实验外包公司慧登生物推荐你将其储存在-20℃的条件下。 4、CCK8能不能对活细胞进行染色呢? 细胞实验外包公司慧登生物告诉你:不可以。这是因为CCK8主要成分是一种水溶性的四唑盐(WST8),并利用电子载体1-MethoxyPMS将活细胞中的电子交换到培养基中的WST8上,由于生成的物质都是高度水溶性的,所以CCK8不可以对细胞进行染色。 5、CCK8检测溶液对细胞有没有毒? 虽然CCK8溶液自身因为高浓度的1-MethoxyPMS它的存在,会具有一点儿毒性,可是,加进培养基中的CCK8后是不存在毒性的,这是因为它被稀释了10倍,所以说,完全不用担心其有毒。 6、每一次测定的值不同,是怎么回事?怎样解决? 按照细胞实验外包公司慧登生物多年经验总结,可能有以下几种原因: 第1个是当在培养箱内培养时,培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发,由于体积不准确而增加误差,通常情况下,细胞实验外包公司慧登生物推荐你,最外一圈的孔只加培养基,不当作测定孔用。 第2个原因就是可能会因CCK8沾在壁上而出现误差,在加入CCK8后,细胞实验外包公司慧登生物推荐你一个方法,就是轻轻地敲打培养板来帮助混合均匀。 第3个原因就是每孔的细胞数量过多或过少,可自检下。 7、设定参比波长的目的是什么?必须设定吗? 细胞实验外包公司慧登生物告诉你:并不一定。CCK-8试剂在参比波长没有吸光度。设定参比波长的目的就是为了取出由于样品混浊所带来的吸收。 好了,以上就是细胞实验外包公司慧登生物,对大家在用CCK-8法做细胞增殖实验时遇到的一些问题的解答,还有任何疑问或者实验困难的,可以直接咨询细胞实验外包公司慧登生物客服,24小时在线免费咨询! |
