裸鼠成瘤构建怎么做？动物实验外包公司哪家好？

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今天湖南长沙动物实验外包公司慧登生物为大家介绍裸鼠成瘤构建，裸鼠成瘤构建是将体外传代培养的肿瘤细胞接种至免疫缺陷小鼠（裸鼠）体内，观察肿瘤的形成、发展及抗肿瘤药物的效果。下面湖南长沙动物实验外包公司慧登生物为大家介绍大致步骤如下：

选择适宜的实验动物：选取雄性、4-6周、18-20g左右的裸鼠。

成瘤细胞的准备：选用769-P稳定过表达TINAG细胞和稳定敲除TINAG的769-P作为成瘤细胞。 在保证细胞状态良好的条件下扩增足够的细胞。 待细胞长到指定数量时，将细胞用胰酶消化下来，1000rpm离心后，去除上清，加入PBS将细胞洗一遍，再次加入PBS重悬，对细胞进行计数，将数量调整为107个细胞/ml。

成瘤细胞的接种：4-6周龄10只裸鼠适应性饲养一周后，随机分为2组，每组设置5只裸鼠，分为对照组和实验组。 在超净台内用75%的酒精消毒处理手术区域，对实验组裸鼠右前肢皮下接种0.5ml（5x106个细胞）的769-P稳定过表达TINAG的细胞悬液，注射后旋转拔出针头，防止细胞悬液漏出。 并对实验小鼠做好标记。 对照组小鼠接种同等数量的稳定敲低TINAG的769-P细胞。

接种后观察：接种后每天观察裸鼠健康状态及肿瘤生长情况；待成瘤后，每2天测量肿瘤长径与短径并计算肿瘤体积（肿瘤体积=0.52×长径×短径2）。

以上是裸鼠成瘤构建的大致步骤，实际操作中可能会根据实验需要稍有改动。湖南长沙动物实验外包公司慧登生物提醒大家，裸鼠成瘤构建的注意事项如下：

Ø 收集细胞前一天晚上更换新鲜培养基。

Ø 胰酶消化细胞后用预冷的PBS洗两遍，目的为去除细胞中的血清。

Ø 接种前用枪将细胞悬液充分的吹散，防止细胞成团而降低细胞成活率。

Ø 接种时，针头在皮下进针深一点，约1cm深，减少注射后细胞悬液从针眼溢出。

Ø 注射过程中，细胞需一直置于冰上，使细胞处于比较低的代谢状态。

Ø 接种尽量在半小时内完成。

总之，裸鼠成瘤构建需要注意多方面的问题，以得出准确可靠的实验结果，可以选择一家具有良好口碑和信誉的动物实验外包公司，动物实验外包公司哪家好？湖南长沙动物实验外包公司慧登生物能够为大家提供专业的服务和高质量的实验结果。如果你有任何疑问，可直接咨询湖南长沙动物实验外包公司慧登生物客服，24小时在线免费咨询！