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WB实验外包公司答疑:WB条带有问题,你这么来做!

相信不少人在做WB时会出现很多问题,比如条带失踪、背景漆黑、杂带丛生等,但你知道这些问题产生的原因是什么吗?又该怎么去解决呢?今天那就和靠谱的湖南长沙WB实验外包公司慧登生物一起来学习下吧~


WB实验问题一:WB胶图没条带


这种的话,就是我们完全看不到条带,这里列举了一些常见的原因及对应解决方案:


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湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:完全没条带的出现,很多都是操作者操作的时候操作不当所导致的,所以一定要自检自己的实验步骤是否正确,对于抗体的选择,建议实验开始前做预实验,调整出抗体的最佳稀释比。

 

WB实验问题二:WB胶图条带浅


这种的话,就是我们能够肉眼看到目标蛋白条带,但就是目标条带在膜上颜色较浅,只有那么一点点,这里列举了一些常见的原因及对应解决方案:


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湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:这种情况在时间上的掌握更加的准确点就能很好解决。


WB实验问题三:高背景


导致这种情况的因素也很多,这里列举了一些常见的原因及对应解决方案:


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湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:避免这个情况出现的话,诀窍就是一定要操作到位。


WB实验问题四:条带异常


能看到目标蛋白条带,但就是条带很奇怪,这里列举了一些常见的原因及对应解决方案:


1、条带中间开个口


湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:这种情况通常是配制胶有问题,自查下。


2、条带向上拱起


湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:首先也是自查下是不是配制胶出问题了,其次自查下是不是样本问题。


3、条带中间空白


湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:中间空白,两端有信号的话,可能是由于蛋白上样量过高导致中间HRP与底物反应过快,中间部位底物消耗完之后无法发光。降低上样的蛋白量或者降低一抗与二抗的浓度试试。


4、有拖带


湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:出现这个问题的话,可能是因为凝胶制备不均匀、缓冲液离子强度不合适或者样品上样过多、样品中有不溶物、核酸污染及盐离子浓度过高等,自查下。


5、出现黑色斑点


湖南长沙WB实验外包公司慧登生物提醒:首先自查下操作过程中是否不当造成了污染,没有的话就可能是因为一抗或二抗与膜上其他部位非特异性结合(如封闭液),或者抗体自身发生了过度聚集。


以上就是湖南长沙WB实验外包公司慧登生物关于WB条带的常见问题答疑了,大家还有疑问的,可直接咨询湖南长沙WB实验外包公司慧登生物客服,24小时在线免费咨询!




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