病理实验：TUNEL染色怎么老是失败？有合适的外包服务公司推荐吗？

TUNEL染色，我们常用来检测细胞凋亡情况，其原理是基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶的催化下加上荧光素标记的脱氧尿苷三磷酸，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测细胞凋亡的情况。但是由于很多人经验不足，在实际的TUNEL染色实操过程中遇到了很多问题，导致实验结果不理想，所以，今天湖南病理实验外包服务公司慧登生物就根据自己TUNEL染色检测细胞凋亡时，总结的一些注意事项和技巧分享给大家，希望能在实验的操作中给到大家一定的帮助！

病理实验TUNEL染色注意事项：

1、固定液最好使用4%的PBS进行固定，不建议选用乙醇和甲醇，也不能用甲醛替代；

2、湖南病理实验外包服务公司慧登生物提醒：固定液浓度不可过高。固定液浓度过高会使组织边缘迅速固定，影响液体的穿透，影响固定效果，导致组织中心的细胞自溶、DNA链不规则断裂等情况的发生，使结果假阳;

3、湖南病理实验外包服务公司慧登生物提醒：固定时间不可过长，太长的固定时间会影响试剂的染色效率;

4、湖南病理实验外包服务公司慧登生物提醒：水化用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，这些以便后面的结合反应充分、均匀;

5、蛋白酶k的孵育时间有要求，湖南病理实验外包服务公司慧登生物提醒：一般根据切片的厚薄，选择蛋白酶k的孵育时间，常为十到三十分钟;

6、荧光在普通光照下不能长时间保持荧光，在进行需要避光操作的步骤时，湖南病理实验外包服务公司慧登生物提醒：我们要严格进行避光操作，避免荧光淬灭导致不能对实验结果有准确判断;

7、一定要清楚，贴壁细胞在加药诱导凋亡后，细胞状态会发生改变，细胞形态皱缩边缘，其贴壁粘附力降低。湖南病理实验外包服务公司慧登生物提醒：在对此细胞进行实验染色时，需要小心操作，避免吹打造成细胞脱落，尤其是细胞洗涤时。

好了，由于篇幅有限，关于病理实验TUNEL染色注意事项今天就简单说了这几个了，还有疑问的，可直接咨询湖南病理实验外包服务公司慧登生物客服，24小时在线免费咨询！