流式细胞实验常见问题解答！

对于科研小白来说，由于实操经验不足，所以在实验中会遇到很多问题不知道怎么解决，所以，今天流式细胞实验外包公司慧登生物就对流式细胞实验中常见的一些问题做下解答，有需要的可以收藏一下！

1、问：流式染色离心力如何选择？

答：若只是表面染色，细胞离心力流式细胞实验外包公司慧登生物推荐300 g~500 g，例如，细胞比较大的比如肿瘤细胞就选择300 g离心，细胞比较小的比如淋巴细胞则选择500 g离心，离心时间设置5~10 分钟。若是胞内染色的话，则需适当的提高离心力，离心力可以调整为600~800 g，离心时间10~15分钟。

2、问：流式染色时间及温度如何选择？

答：首先，流式细胞实验外包公司慧登生物提醒：加入抗体一定要混匀，再说到染色时间和温度问题，室温染色15 分钟，或者4℃染色30分钟看自己实际情况选择即可，染色中途记得混匀一次，并且一定要记得轻柔点弹管子，不要用枪头吹打，避免损伤细胞。

3、问：流式上样速度如何选择？

答：流式细胞实验外包公司慧登生物一般建议，上样速度控制在10000个/秒以内，上样速度太高，容易堵塞吸样针，并且会导致检测不准确。

4、问：细胞固定后能染色吗？

答：流式细胞实验外包公司慧登生物建议，固定后不要染色。这是因为甲醛固定后会导致某些抗原表位的丢失，并且，残留的甲醛会和抗体分子非特异性结合，容易导致染色效率不高。

5、问：细胞自发荧光如何解决？

答：培养时间较久的原代细胞、药物处理（药物本身就有自发荧光）的细胞、植物细胞（含有叶绿素）、分泌核黄素的细胞，这些细胞自发荧光比较强，确实在流式染色中不能忽视。所以，一旦遇到存在自发荧光的情况下，一定要注意对染色结果的影响（特别是做低表达抗原检测时），流式细胞实验外包公司慧登生物建议，如果允许，尽量选择避开干扰的荧光染料，尤其是在做凋亡检测时，一定要注意选择避开干扰的Annexin V染料，如Annexin V-APC。

好了，以上就是流式细胞实验外包公司慧登生物关于流式细胞实验中常见的一些问题的答疑，如果你还有疑问的，可直接咨询湖南长沙流式细胞实验外包公司慧登生物客服，24小时在线免费咨询！