人外周血细胞表面抗原的流式检测具体实验操作步骤

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人外周血细胞表面抗原的流式检测具体实验步骤：

1. 在每个流式检测管或板式微孔中，加入50ul的荧光标记或生物素标稀释后的一抗（抗体用缓冲液稀释成合适的浓度）；在空白管/孔或同型对照管/孔中加入50ul 缓冲液。

2. 每管分别加入100ul全血，并轻轻混匀。

3. 避光孵育15-30分钟。长沙流式细胞实验外包公司慧登生物提醒，有些结合能力较低的抗体可能需要更长的孵育时间，建议进行预试验。

4. 每管分别加入2ml RBC lysis Buffer（长沙流式细胞实验外包公司慧登生物提醒，之前预热恢复至室温），混合均匀。

5. 室温避光孵育10分钟，长沙流式细胞实验外包公司慧登生物提醒，此孵育时间不要超过15分钟。

6. 室温300-400g离心5分钟，并弃去上清。

7. 用2ml 缓冲液洗涤细胞一次。

8. 重悬细胞后上流式仪检测，若使用的一抗是荧光直接标记抗体，用500ul 缓冲液或2%的多聚甲醛固定液重悬细胞后，上机检测。

9. 试验结果分析。

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