细胞增殖检测有哪些方法，哪种更省钱？

众所周知，目前我们进行细胞增殖检测有多种方法，但那哪种方法更省钱，哪种方法又更值得推荐呢？

今天湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物就根据实验方案和实验目的的不同，给大家详细介绍下以下几种细胞增殖检测方法：

1、直接计数法

细胞计数法很简单，不需要特殊的试剂和仪器，所以对于场地和实验设备稀缺的实验人员来说，是比较好的选择，因为整个实验，只需利用血球计数板或细胞计数仪就可计算得出细胞数目。

一般过程为接种21孔/24孔板细胞（如用培养瓶时则21瓶）。我们分7组，每组3孔（或瓶），培养一周，期间逐日检测一组，计数。把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。

细胞实验外包公司慧登生物提醒，这种直接计数方法主打简单、省钱，但这方法缺点也很明显，就是无法区分增殖细胞与非增殖细胞，不适合数量较多或特定亚群的细胞计数，所以针对细胞数量多的情况，这个细胞增殖检测方法一般我们不推荐！

2、检测细胞代谢活性方法

这个细胞增殖检测方法是使用分光光度计或者酶标仪检测吸光度，从而间接测定活细胞数量，检测细胞增殖情况。主要实验方法有MTT、CCK-8、MTS、XTT及SRB法。

这里简单说下MTT比色法，这个细胞增殖检测方法的实验原理就是，活细胞内的线粒体中的琥珀酸脱氢酶可以将淡黄色的MTT还原成蓝紫色结晶甲臜，用二甲基亚砜 (DMSO)溶解甲臜，测570nM波长下的OD值，溶液颜色的深浅与细胞数量成正比。

但细胞实验外包公司慧登生物提醒大家的是，MTT法不能测悬浮细胞的增殖情况，因为在溶解甲臜之前，需将培养液吸出，这一步操作，如果是经验不够的实验员操作，就很容易造成甲臜流失，导致实验结果偏差，所以细胞实验外包公司慧登生物推荐，大家可以优先选择有经验的细胞实验外包公司进行协助，效率更高。

MTT法实验步骤：每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS配制) 20ul，继续孵育4 h，终止培养，细胞实验外包公司慧登生物提醒，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，脱色摇床振荡10min，使结晶物充分融解，测570nM波长下的OD值。

3、检测细胞DNA合成方法

这个方法是通过直接测定细胞的DNA合成含量来评价细胞的增殖能力，这是目前检测细胞增殖比较准确的方法，细胞实验外包公司慧登生物更为推荐。这个细胞增殖检测最常用的方法就是：BrdU/EdU检测法。

Brdu中文全名5-溴脱氧尿嘧啶核苷，为胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活体注射或细胞培养加入，而后利用抗Brdu单克隆抗体，ICC染色，显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物，双重染色，可判断增殖细胞的种类，增殖速度。

当然，实验室里，检测细胞增殖情况的方法还有很多种，但是由于篇幅有限，今天就只说了这几种，大家感兴趣的、或者是对实验有疑问的，可以直接咨询湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物客服，24小时在线免费咨询！