（流式细胞仪篇）3种细胞凋亡检测实验，你选哪种？

检测细胞凋亡有很多种方法，其中用流式细胞仪的话，怎么做效果更好呢？现在临近毕业，时间又紧，大家有合适靠谱的实验外包公司推荐吗？

我们都知道，选择一家符合要求的、具备良好口碑和信誉的实验外包公司是流式检测细胞凋亡实验成功的关键所在，那么长沙流式检测细胞凋亡实验外包公司哪家好呢？湖南长沙慧登生物实验室是个非常不错的选择，拥有完善的实验场地，经验丰富、技术娴熟的技术团队，能够提供高质量的流式检测细胞凋亡实验服务。

下面就和流式检测细胞凋亡实验外包公司长沙慧登生物实验室来看看哪个检测方法更好，更适合你吧！

流式检测细胞凋亡实验方法1：PI单染色法

实验步骤：

1. 收集细胞｛数目约（1~ 5）×106个/mL｝，500 ~ 1000 r/min离心5min，弃去培养液。

2. 3ml PBS洗涤1次。

3. 离心去PBS，加入冰预冷的70%的乙醇固定，4℃，1—2小时。

4. 离心弃去固定液，3ml PBS重悬5min。

5. 400目的筛网过滤1次，500—1000r/min离心5min，弃去PBS。

6. 用1ml PI染液染色，流式检测细胞凋亡实验外包公司长沙慧登生物实验室提醒，记得避光，4℃避光30min。

7. 流式细胞仪检测：PI用氩离子激发荧光，激光光波波长为488nm，发射光波波长大于630nm，产生红色荧光分析PI荧光强度的直方图也可分析前散射光对侧散射光的散点图。

流式检测细胞凋亡实验方法2：Heochst 33342/PI双染色法

实验步骤：

1. 悬浮生长的细胞在培养的状态下加入Heochst 33342 ，终浓度为1ug/ml； 37℃孵育7—10min。

2.低温500 ~ 1000r/min离心5min弃去染液。

3. 加入1.0ml PI染液，同样的，流式检测细胞凋亡实验外包公司长沙慧登生物实验室提醒，记得避光，4℃避光染色15min。

4. 400目的筛网过滤1次。

5. 流式细胞仪分析：Heochst 33342用氪激光激发的紫外线荧光，激发光波波长为352nm，发射光波波长为400 ~ 500nm，产生兰色荧光；PI用氩离子激光激发荧光，激发光波波长为488nm，发射光波波长大于630nm，产生红色荧光。分析兰色荧光对红色荧光的散点图或地形图。

流式检测细胞凋亡实验方法3：Annexin V/PI双染色法

实验步骤：

1. 细胞收集：悬浮细胞直接收集到10ml的离心管中，每样本细胞数为（1~5）×106，/mL　500~1000r/min离心5min，弃去培养液。

2. 用孵育缓冲液洗涤1次，500~1000r/min离心5min。

3. 用100ul的标记溶液重悬细胞，流式检测细胞凋亡实验外包公司长沙慧登生物实验室提醒，记得避光，室温下孵育10~15min。

4. 500~1000r/min离心5min沉淀细胞孵育缓冲液洗1次。

5. 加入荧光（SA-FLOUS）溶液4℃下孵育20min，避光并不时振动。

6. 流式细胞仪分析：流式细胞仪激发光波长用488nm，用一波长为515nm的通带滤器检测FITC荧光，另一波长大于560nm的滤器检测PI。

好了，以上就是长沙慧登生物实验室关于流式检测细胞凋亡实验方法的介绍了，对于哪种实验方法更好呢，大家还是可以按照自己的实验需求择优选择，各有优势，当然，如果你对该实验还有任何疑问的，可直接咨询流式检测细胞凋亡实验外包公司长沙慧登生物实验室客服，24小时在线免费咨询！