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CFSE检测细胞增殖-流式检测方法有哪些要注意的?细胞实验外包公司有推荐吗?

众所周知,传统的测定细胞增殖的方法有MTT/CCK8比色法,Brdu法等等,但这些方法也有着它们的不足之处,就是比色法只能在总体水平上提供细胞数总量变化的信息,不能在单个细胞水平上分析细胞增殖信息;Brdu法只能检测处于S期的细胞,仅能反应细胞增殖率,只适用于短期检测。


那哪种检测方式更值得推荐呢?


CFSE检测细胞增殖-流式检测你可以试试!因为CFSE可自由穿透细胞膜,且一旦进入细胞后不能从细胞中释出,在活细胞内与胞内蛋白进行不可逆的结合,并在细胞内被酯酶水解后释放出绿色荧光,在细胞分裂增殖过程中,它的荧光会平均分配至两个子代细胞中,从而导致荧光强度随着细胞的分裂而逐级递减,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖。


而其与流式细胞染色技术相结合,不仅在单个细胞水平上检测细胞增殖,且能够动态的分析细胞增殖,所以备受大家喜欢。


CFSE检测细胞增殖-流式检测染色基本流程:


DPBS洗涤离心收集细胞→DPBS重悬→加CFSE染色→37℃孵育→DPBS洗涤离心收集细胞→含10%FBS的培养基洗涤离心收集细胞→重悬于完全培养基→37℃培养→取细胞洗涤进行后续常规流式染色或直接重悬上机。


自己做有点难度,那有合适的细胞实验外包公司推荐吗?


我们都知道,一家符合要求的、且具备良好口碑和信誉的细胞实验外包公司,是我们成功完成细胞实验的关键所在,那么CFSE检测细胞增殖-流式检测这个实验,外包给细胞实验外包公司的话哪家更靠谱?哪家更值得推荐呢?湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物就是个非常不错的选择,拥有经验丰富、技术娴熟的技术团队,能够提供高质量的细胞实验外包服务。


今天就跟着细胞实验外包公司慧登生物来看看CFSE检测细胞增殖-流式检测方法有哪些要注意的吧!


1、CFSE粉末,使用DMSO进行溶解后,细胞实验外包公司慧登生物推荐分装保存避免反复冻融,放久了,CFSE的标记率会下降,所以尽快用完。


2、使用DPBS是为避免染色环境中存在的叠氮化物、血清或蛋白质结合游离CFSE染料干扰细胞染色,相对PBS效果更佳,所以,细胞实验外包公司慧登生物建议,千万不可直接在培养基中进行染色孵育。


3、CFSE初始浓度过高会导致细胞死亡或抑制细胞增殖,过少又会影响标记效率。细胞实验外包公司慧登生物推荐浓度0.5~5 μM更合适,当然,具体实验具体讨论,所以建议提前做下预实验。


好了,以上就是CFSE检测细胞增殖-流式检测的相关介绍了,当然,如果你对实验还有疑问的,可以直接咨询细胞实验外包公司慧登生物,24小时在线免费咨询。




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