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线粒体膜电位检测实验怎么做?湖南长沙细胞实验外包公司哪家好?

众所周知,线粒体膜电位检测是以JC-1为荧光探针,来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位变化,可以用于检测线粒体的健康状态,也是用来检测细胞早期凋亡情况。


但对于新手而言,因为条件和技术有限,有时候很难完成线粒体膜电位检测实验,这时候可以找个靠谱的细胞实验外包公司协助!那问题来了,湖南长沙细胞实验外包公司哪家好呢?有好的靠谱的推荐吗?


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下面就和湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室一起来看看,对于悬浮细胞和贴壁细胞,我们如何进行线粒体膜电位检测吧!


实验步骤:


对于悬浮细胞


1、取1.0-6.0×10^5细胞,重悬于0.5ml细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。


2、加入0.5ml JC-1染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。


3、在孵育期间,配制适量的JC-1染色缓冲液,并放置于冰浴。


4、37℃孵育结束后, 600g,4℃,离心3-4分钟,沉淀细胞。弃上清,湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室提醒,注意尽量不要吸除细胞。


5、用JC-1染色缓冲液洗涤2次:加入1ml JC-1染色缓冲液重悬细胞,600g,4℃,离心3-4分钟,沉淀细胞,弃上清,再重复操作一次。


6、再用适量JC-1染色缓冲液重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室提醒,当然也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。


对于贴壁细胞


湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室提醒,如果希望采用荧光分光光度计或流式细胞仪检测,可以先收集细胞,重悬后参考悬浮细胞的检测方法。


1、对于六孔板的一个孔,吸除培养液,根据具体实验如有必要可以用PBS或其它适当溶液洗涤细胞一次,加入1ml细胞培养液。湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室提醒,细胞培养液中可以含有血清和酚红。


2、加入1ml JC-1染色工作液,充分混匀。细胞培养箱中37℃孵育20分钟。


3、在孵育期间,按照每1ml JC-1染色缓冲液加入4ml蒸馏水的比例,配制适量的JC-1染色缓冲液,并放置于冰浴。


4、37℃孵育结束后, 吸除上清,用JC-1染色缓冲液洗涤2次。


5、加入2ml细胞培养液,培养液中可以含有血清和酚红。


6、荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。


好了,关于线粒体膜电位检测实验的方法,今天就只说到这了,如果你对实验方法还有疑问的,可以直接咨询湖南长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室客服,24小时在线免费咨询。




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