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流式细胞术检测细胞周期,细胞实验外包公司有推荐吗?

流式细胞术检测细胞周期实验,对于新手来说,因为经验和技术有限,要做好还是很难的,这时候可以找个靠谱的细胞实验外包公司协助!那问题来了,长沙细胞实验外包公司哪家好呢?有推荐吗?


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流式细胞术检测细胞周期,一般是采用经典的碘化丙啶(PI)染色的方法进行周期分析, PI可以和双链DNA结合产生荧光,荧光强度和DNA含量呈正比,因此,我们可以根据DNA含量的多少来进行细胞周期的分析检测。


流式细胞术检测细胞周期实验步骤:


1.用6孔板培养细胞,待细胞生长达到60%-70%,根据实验需求处理,继续培养;


2.根据实验细胞处理后,把细胞吸出至1.5ml离心管内,200g 离心5min;


3.用 PBS 洗涤细胞2次,200g离心5min,收集1-5×105 细胞;


4.细胞固定:加入1ml冰浴预冷70%乙醇中,长沙细胞实验外包公司慧登生物提醒,一定要轻轻的吹打混匀,4℃固定2h或更长时间,(一般的话,长沙细胞实验外包公司慧登生物建议固定12-24 h可能效果更佳)。200g左右离心3-5min,沉淀细胞。加入约1ml冰浴预冷的PBS,重悬细胞。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,(长沙细胞实验外包公司慧登生物建议,可以残留约50μl左右的PBS,以避免吸走细胞)。轻轻弹击离心管底,(长沙细胞实验外包公司慧登生物提醒,这样做是为了分散细胞,避免细胞成团)。当然了,还需要注意的是,70%乙醇在使用前一定要记得进行预冷处理;


5.配制碘化丙啶染色液;


6.染色:每管细胞样品中加入0.5 ml碘化丙啶染色液,缓慢并充分重悬细胞沉淀,37℃温浴30min,(长沙细胞实验外包公司慧登生物提醒,记得避光)。随后可以4℃或冰浴避光存放。染色完成后宜在24h内完成流式检测;


7.流式检测:用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光,同时检测光散射情况。


好了,关于流式细胞术检测细胞周期的实验今天就说到这了,如果你对流式细胞术检测细胞周期实验还有疑问的,可以直接咨询长沙细胞实验外包公司慧登生物客服,24小时在线免费咨询。



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