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WB实验,外包公司怎么处理这些“奇葩”条带?长沙慧登生物实验室来告诉你!

Western blot实验,是一种基于抗原抗体的特异性结合,半定量检测样品中某种蛋白的技术,在分子生物学、生物化学和免疫遗传学等多领域应用到。


虽然Western blot实验看似基础简单,但是想做好却是很难,我们经常会遇到各种“奇葩”条带,那这些是什么原因导致的呢,我们又该如何解决呢?


WB实验外包公司长沙慧登生物实验室,位于湖南长沙,他们拥有经验丰富、技术娴熟的专业团队,而且还具备良好的实验设施和专业的实验场地,相信能够给你提供高质量的WB实验外包服务。今天就和WB实验外包公司长沙慧登生物实验室一起来学习下吧~


“奇葩”条带1. 出现黑点或黑斑


出现此情况的话,原因可能是试剂污染,抗体结合到封闭剂。WB实验外包公司长沙慧登生物实验室建议的解决方法是,可以使用新鲜配置的试剂;过滤封闭液;选用其他类型封闭液。


“奇葩”条带2. 条带中出现边缘规则的白圈


造成这样的原因可能是转膜时膜和胶中间有气泡,或抗体在膜上未均匀分散。WB实验外包公司长沙慧登生物实验室建议的解决方法是,制备转膜凝胶时用玻棒赶去气泡;使用摇床孵育抗体。


“奇葩”条带3. 条带拖尾


发生这情况的原因可能是样品有未溶颗粒;分离胶浓度偏大。WB实验外包公司长沙慧登生物实验室建议的解决方法是,可以充分溶解,加样前离心;换小浓度分离胶。


“奇葩”条带4. 条带扭曲,如微笑带


可能是因为胶未配好(凝胶未能完全聚合,胶中有颗粒或气泡,凝胶未冷却好);电压过高。WB实验外包公司长沙慧登生物实验室建议的解决方法是,正确添加质量合格且未过期的 AP 及 TEMED;过滤配胶的试剂保证配胶过程中胶内无气泡;凝胶冷却好后再上样;降低电压。


“奇葩”条带5. 出现非均一性背景


膜可能曾经干过,所以才出现这样的问题,WB实验外包公司长沙慧登生物实验室建议提醒,在实验过程中要保证膜一直处于湿润状态。


“奇葩”条带6. 条带中间出现白色(反白)


可以自查下,是不是中心部位高浓度 HRP 将底物消耗过快,中间部位底物消耗完后无法发光。针对这个问题,WB实验外包公司长沙慧登生物实验室建议的解决方法是,降低蛋白量,降低一抗与二抗的浓度。


当然,奇葩条带远不止上面说的这些,比如高背景、非特异性条带(杂带)等等,相信大家也遇到过,那遇到这样的条带我们又该怎么处理呢?大家可以直接咨询WB实验外包公司长沙慧登生物实验室客服,24小时在线免费咨询!

 



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