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(流式细胞仪)细胞凋亡检测实验方法介绍!细胞实验外包公司有推荐吗?目前,绝大部分实验室用流式细胞仪进行细胞凋亡检测的方法有这3种,PI单染色法、Heochst 33342/PI双染色法和Annexin V/PI双染色法。 这3种方法都非常考验操作人员的技术,也需要有专业仪器进行检测(细胞流式仪比较贵,很多实验室并没有),所以,对于那些没有仪器或经验的科研小白来说,寻找一家可靠且专业的细胞实验外包公司很重要,那问题来了,湖南长沙有合适的细胞实验外包公司推荐吗? 长沙慧登生物实验室我们比较推荐,因为他们拥有经验丰富、技术娴熟的专业团队,而且还具备良好的实验设施和专业的实验场地,相信能够给你提供高质量的细胞实验外包服务。 今天就和长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室一起来学习下,如何用流式细胞仪进行细胞凋亡检测吧~ (流式细胞仪)细胞凋亡检测实验推荐方法一:PI单染色法 1. 收集细胞500-1000 r/min离心5min,弃去培养液。 2. 3ml PBS洗涤1次。 3. 离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1-2h。 4. 离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5. 400目的筛网过滤1次,500-1000r/min离心5min,弃去PBS。 6. 用1ml PI染液染色,4℃、30min,长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室提醒,记得避光。 7. 流式细胞仪检测。 (流式细胞仪)细胞凋亡检测实验推荐方法二:Heochst 33342/PI双染色法 1. 悬浮生长的细胞在培养的状态下加入Heochst 33342,终浓度为1ug/ml;37℃孵育7-10min。 2.低温500-1000r/min离心5min弃去染液。 3. 加入1.0ml PI染液,4℃,染色15min,长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室提醒,也要记得避光。 4. 400目的筛网过滤1次。 5. 流式细胞仪分析。 (流式细胞仪)细胞凋亡检测实验推荐方法三:Annexin V/PI双染色法 1. 细胞收集:悬浮细胞直接收集到10ml的离心管中,500-1000r/min离心5min,弃去培养液。 2. 用孵育缓冲液洗涤1次,500-1000r/min离心5min。 3. 用100ul的标记溶液重悬细胞,室温下孵育10~15min,长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室再次提醒,记得避光。 4. 500-1000r/min离心5min沉淀细胞孵育缓冲液洗1次。 5. 加入荧光溶液4℃下孵育20min,避光并不时振动。 6. 流式细胞仪分析。 好了,(流式细胞仪)细胞凋亡检测实验做完!3种实验方法的结果又怎么看呢?怎么判断呢?这也是一门学问,但这由于篇幅有限,我们今天就不详细讨论交流了,如果大家对此想深入学习的,可以直接咨询长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室客服,24小时在线免费咨询! |
