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要进行细胞实验了,但突然发现细胞污染了,怎么补救?复苏的细胞背景脏和出现小黑点,这在各大实验室都有发生过,这是很正常的,原因有很多,比如细胞碎片、细胞器折光、凋亡小体、血清中的沉淀物、微生物污染(如细菌、真菌、支原体等)或黑胶虫污染等等。 如何区分是细胞碎片还是微生物污染呢? 靠谱的长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室建议,可以通过以下几个步骤简单辨别: 1、看黑点动不动:如果黑点在显微镜下很活跃,动来动去,那可能是细菌污染。细胞碎片通常不会移动或只表现出布朗运动。 2、看黑点的形状:如果是细菌,那培养液中一般会出现大量相同大小的黑点,细胞碎片的话,通常大小不均一。 3、看培养基浑不浑浊:浑浊且发黄的话大概率就是微生物污染。 4、看细胞状态:细胞状态不佳就可能产生细胞碎片(特别是原代,特别容易产生碎片,所以我们切记要勤换液),此时可以加入清除试剂测试下,如果后面细胞状态有显著改善,这黑点可能就是由微生物污染了。 那细胞污染了怎么办呢?还能救的回吗? 一般的话,只要细胞污染,如果不是十分珍贵的细胞,靠谱的长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室建议是处理后丢弃,重新培养,因为要想完全去除细胞中的微生物污染是非常困难的! 但是吧,如果实在舍不得,也是有办法的,比如黑胶虫污染,黑胶虫污染主要源于血清,靠谱的长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室建议可以更换批次较好的血清、使用无菌的PBS洗细胞、换用一次性塑料培养瓶等等降低被污染的可能性。 黑胶虫污染处理步骤: 1、用0.25%的胰酶消化,当有少量细胞变圆或脱壁时,用血清终止消化。 2、用培养液或D-Hanks液清洗3遍(缓缓流过细胞表面),不要吹打,吹散细胞。 3、换培养瓶培养,隔天换液,2天后重复一次。 4、每24-36h换液一次,一周后,查看黑点是否基本消失。 如果不是污染,我们又怎么处理呢? 对于细胞碎片和凋亡小体,可以通过离心和更换新鲜培养基来清除。 如果是血清中的沉淀物,那靠谱的长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室建议你不用热灭活处理血清,因为热灭活可能会增加沉淀物的形成。 好了,细胞污染的问题解决了,如果大家对其他实验还有不明白的,或者是需要实验协助指导的,可以直接咨询靠谱的长沙细胞实验外包公司慧登生物实验室客服,24小时在线免费咨询。 |
