首页 >> 实验室动态 >>医学实验干货 >> WB实验时,为什么拔梳子胶老歪?有办法补救吗?
详细内容

WB实验时,为什么拔梳子胶老歪?有办法补救吗?

别忽视,长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒大家,在Western Blot实验中,上样前我们除了配胶、装板以及配制电泳缓冲液外,拔梳子也是一个关键步骤,搞不好你的胶就歪了!拔梳子时遇到胶歪的情况,不仅会影响蛋白上样的准确性,还会导致实验结果的不可靠性,又得重来!


为什么拔梳子会出现胶歪的情况呢?


最常见(新人常犯)的问题就是时机未到,胶尚未完全凝固,你就拔梳子了。胶尚未完全凝固时,就开始装板加入电泳缓冲液拔梳子,就很容易造成胶瞬间流动或胶柱残缺不全,最终导致上样孔变形。而如果胶到时间还未完全凝固,长沙实验外包公司慧登生物实验室此时建议你可以查下是不是试剂的有效性出问题了、配比错误或混合不均匀等情况。


其次,梳子与玻璃板不匹配也有可能,如果梳子与玻璃板之间存在间隙或梳子插入时过于紧密,都可能在拔梳子时导致胶歪。因此,长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒,在灌胶前应先测试梳子是否与玻璃板匹配。


也不排除你拔梳子方式不正确,长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒,拔梳子时用力不均或过快过猛,都可能使梳子孔道的胶发生歪斜。正确的拔梳子方式应该是双手在梳子两边均匀用力,动作缓慢轻柔,边拔边看,保证梳子水平地拔出。


当然,温度也会造成影响的,尤其是到冬天,整体气温较低,如果真是温度问题,那长沙实验外包公司慧登生物实验室建议你,在实验室做实验的时候,凝胶凝固时间适当延长。


最后,还可以看看是不是梳子上有杂质,因为如果梳子上残留有杂质,在插入胶中时会影响到胶的完整性,拔取时可能会造成上样孔及胶柱不全的情况。


胶已经歪了,那丢掉吗?有补救的办法吗?


方法当然是有的,长沙实验外包公司慧登生物实验室觉得,这个方法你可以试试!


使用5 mL注射器,然后将注射针头放于胶柱倾倒处,轻柔多次拨弄,可以慢慢让胶柱还原。如果胶柱歪倒非常严重,只要保证样品可以加进去即可停止操作。另外,出现胶柱变形后,在上样时,长沙实验外包公司慧登生物实验室建议你,这时候选择使用细长的枪头,比如20 uL白色枪头,这样可以避免样品在胶柱上沉积困难的情况。


好了,关于WB实验拔梳子胶歪的问题就说这么多了,如果大家对WB实验还有不明白的或者是需要实验协助指导的,可以找长沙实验外包公司慧登生物实验室客服老师免费咨询哦~




在线留言
更多
您的姓名
联系电话
留言内容
Copyright @2022 湖南慧登生物科技有限公司.    湘ICP备2022011824号-1

如您有任何实验需求和疑问,可在下方留言,收到后我们会第一时间与您联系,感谢您的支持与信任!

扫一扫

关注微信公众号

获取更多资讯


seo seo