ELISA实验老失败？这样做，你也能轻松得到漂亮数据！

ELISA实验，真的没有表面看起来的那么容易做，不然也不会那么多人失败，到处求救了……所以，今天长沙实验外包公司慧登生物实验室就以Proteintech预包被ELISA试剂盒进行实验为例，简单说说ELISA实验操作过程中哪些我们要格外注意吧！

ELISA实验注意点1、酶标板条拆分要当心

除了个人防护和确保工作台面干净整洁外，酶标板条拆分时动作一定要轻柔，避免用力过猛导致板条变形或孔内液体溅出，尤其注意，拆卸后观察板条是否有裂痕或变形，损坏的板条不可继续使用。

长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒大家，记得标记拆卸板条的信息（如实验编号、日期、样本类型）。未使用的板条放回原铝箔袋，加入干燥剂后密封，避光防潮于4℃保存，并于⼀周之内⽤完，要注意，不同批号或实验的板条分开存放，避免误用。

ELISA实验注意点2、做到精准加样

在进⾏标准品、样本以及不同试剂加样时，一定要更换枪头，避免接触微孔板的内表⾯，而且，不同的试剂，使⽤不同的加样槽。加样后若有气泡，用干净枪头轻轻戳破，以免影响OD值读数。

长沙实验外包公司慧登生物实验室建议标准品和样本都做复孔，尽量避免实验误差，确保上样不间断，5-10min完成加样。

ELISA实验注意点3、孵育时控制好时间与温度

长沙实验外包公司慧登生物实验室推荐可以选择37℃孵育2h，但高背景时可尝试室温孵育或者减少孵育时间。长时间孵育的话，记得覆盖好封板膜，这样能有效防止液体蒸发导致浓度变化，想缩短孵育时间的话，可以用水平摇床低速震荡（如400-500 rpm）促进抗原抗体结合。

ELISA实验注意点4、洗涤口诀不要忘

长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒大家，记住口诀：一浸、二倒、三控干！一浸：洗涤液（1×）洗涤板条，每孔350-400µL，用手轻磕板架四周，每边轻磕3-4下，弃掉洗涤液。二倒：快速翻转板子，甩净液体（可在吸水纸上轻拍2-3次）。三控干：倒扣板子于吸水纸上，停留10秒吸残留液。

重复此步骤4次，但是要注意，避免异物进⼊板孔，保持板条⼲燥。

ELISA实验注意点5、显色与终止：把握时机

避光操作：TMB显色液遇光易降解，需保持显⾊底物始终处于避光状态，显⾊底物在加样前应是⽆⾊透明的，长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒大家，如有变⾊，请勿使⽤。

显色观察：阳性孔应呈现梯度蓝色（标准曲线孔），若颜色过深立即终止，如果颜⾊偏浅，可适当延⻓显⾊时间，不超过30 min；

终止顺序：与加样顺序一致！先加显色液的孔先加终止液，避免时间差导致显色不均。长沙实验外包公司慧登生物实验室提醒大家注意安全，眼睛和⽪肤避免接触终⽌液。

板底清洁：用无尘纸擦干板底液体或指纹，避免散射光干扰。

好啦，ELISA实验干货就分享就到这里啦，如果大家还有不明白的或者是需要实验协助指导的，可以直接咨询长沙实验外包公司慧登生物实验室客服哦，24小时在线免费咨询！