免疫组化和免疫荧光有什么区别？实验时我们怎么选？

其实，免疫组化和免疫荧光都可对蛋白定位进行检测（确定蛋白表达在细胞核、细胞质、还是细胞浆），但要仔细说下区别的话，长沙医学实验外包公司慧登生物实验室觉得，主要有以下几个方面的区别：

1、实验原理上

免疫组化是一项包括免疫组织化学和免疫细胞化学的免疫化学技术，利用显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，实现对目标抗原定性、定量、定位分析。免疫荧光则是采用荧光素标记抗体（抗原）作为探针，检测目标组织/细胞中的目标抗原（抗体），形成带有荧光素的抗原抗体复合物。长沙医学实验外包公司慧登生物实验室提醒大家，这种荧光复合物在荧光显微镜下，受高压汞灯光源的紫外光照射，荧光素发出荧光，通过观察荧光可以辨别目标抗原（抗体）的位置。也可借助工具计算荧光抗原的含量实现定量检测。

2、标本制作上

免疫组化使用石蜡切片和冰冻切片均可，但是免疫荧光则通常用冰冻切片，减少杂质干扰。

3、实验步骤上

免疫组化实验流程相对复杂，需要双氧水处理去除内源性酶的影响，还需要DAB显色，使用苏木素染核。而免疫荧光步骤简单，不需要使用双氧水处理，直接封闭孵育一抗，二抗需要使用荧光二抗，通常用DAPI染核。

4、样本保存上

免疫组化样本可以室温长期保存，但免疫荧光样本需要避光低温保存，长沙医学实验外包公司慧登生物实验室提醒大家，拍照时间要短，时间长荧光淬灭。

5、应用范围上

免疫组化灵敏度较高，可以检测组织/细胞中的微量抗原，而免疫荧光灵敏度较低，长沙医学实验外包公司慧登生物实验室提醒，尤其是当抗原含量较低时，荧光强度弱，不易观察。

好了，关于免疫组化和免疫荧光区别的问题说这些了，当然，如果大家还有不明白的或者是需要实验协助指导的，也可以直接咨询长沙医学实验外包公司慧登生物实验室客服老师哦！