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裸鼠皮下荷瘤实验接种结束,为什么我看不到瘤子?裸鼠皮下荷瘤实验相信绝大多数实验室都有做过,但大家的成功率有多少呢,相信很多新手开始时有很多问题发生,今天长沙动物实验外包公司慧登生物实验室就详细给大家讲解分析下~ 裸鼠皮下荷瘤实验接种操作: 1、胰酶消化细胞,计数后将其重悬于生理盐水中。注射前吹打混匀,保证细胞分散无团块; 2、选择进针部位(一般选择腋下或腹股沟等血管丰富的部位),用酒精棉球擦拭进针部位; 3、向前方穿行,注射前针头左右动一下,若无阻力则证明在皮下,否则可能在皮内或肌肉里面; 4、长沙动物实验外包公司慧登生物实验室提醒,注射前一定要排空空气!之后缓慢推注,一般体积为100-150μL,注射完后缓慢拔出针头,可在注射部位看到明显的鼓包; 5、接种点离进针点尽量远一些,防止漏液和污染。 常见问题及处理办法: 问题1:裸鼠注射完为什么看不到瘤子? 原因:一般接种7-10天后便可看到肿块长起,未成瘤可能是:细胞活力差、该肿瘤细胞不易成瘤、有可能小鼠周龄过大或者是小鼠免疫排斥等原因。 长沙动物实验外包公司慧登生物实验室建议的解决方法:加入Matrigel;增加注射的细胞数量;更换易成瘤的细胞系;更换4-6周小鼠;更换重度免疫缺陷的小鼠。 问题2:肿瘤先长后消是怎么回事? 原因:接种时的组织损伤会引发局部炎症,裸鼠自身会清除部分坏死细胞和炎症组织,导致肿瘤暂时性缩小。 长沙动物实验外包公司慧登生物实验室建议的解决方法:继续观察2-3周,多数情况下肿瘤会重新增大;若3周后仍无明显增长,说明存活的肿瘤细胞过少,建议更换裸鼠重新接种。 问题3:肿瘤体积差异过大? 原因:长沙动物实验外包公司慧登生物实验室建议的提醒,部分肿瘤细胞(如黑色素瘤 B16)本身生长形态不规则,体积存在轻微差异(误差≤20%)属正常现象,无需干预。但是若同组裸鼠肿瘤体积差异>30%则是异常现象了。 好了,关于裸鼠皮下荷瘤实验接种操作的问题就说这些了,如果大家还有不明白的或者是需要实验协助指导的,可以直接咨询长沙动物实验外包公司慧登生物实验室客服老师哦! |
