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血管生成实验有疑问?别急,一个个来解答!血管生成实验问题太多了,没关系,今天就和长沙生物医学实验外包公司慧登生物实验室一起来解决下吧~ 1、稀释基质胶用什么稀释? 用不加双抗、不加胎牛血清的高糖的DMEM培养基稀释。 2、怎么样铺胶均匀? 枪头要垂直于内孔的正上方加入基质胶,主要是防止有基质胶流经孔壁而留下残留胶。长沙生物医学实验外包公司慧登生物实验室提醒,若是孔的底部没有铺满胶,可以晃动一下96孔板,使底部铺胶均匀,若还是没有均匀,可用枪头稍微搅动一下。 3、HUVEC用什么培养基培养? 用ECM内皮专用培养基,配制按照说明书。 4、HUVEC必须用专用培养基吗?能不能用普通培养基? 用普通培养基的话,长沙生物医学实验外包公司慧登生物实验室提醒,要添加生长因子,常见的有ECGF/ECGF,ECGF,但价格贵,所以还不如专用培养基来的划算。 5、进行血管形成实验,应该选用多大浓度的基质胶呢? 最低浓度应不低于10mg/mL, 基质胶的稀释比例是6 mg/mL以上。成管效果好的是6-8 mg/mL。 6、HUVEC细胞系换液第二天出现空泡化?是什么原因? 可能原因包括:培养液的pH值与细胞正常所需pH值差别太大,导致细胞代谢异常,出现空泡化;亦或者是在细胞培养过程中,由于血清浓度不够、药物作用、外界刺激等情况下导致细胞代谢出现问题,内质网应激状况下会出现细胞空泡化的情况。 7、HUVEC培养过程中出现聚团如何处理? 如果是由于培养板亲水性差或者血清中的促贴壁因子不足。长沙生物医学实验外包公司慧登生物实验室建议的解决办法是:(1)培养瓶使用前一天使用明胶包被;(2)提高培养液中基质胶浓度;(3)培养基使用ECM内皮专用培养基进行配置。 8、成管实验到底需要几个小时? 细胞状态好时,2-3小时开始成管,细胞状态较差时,可能18-24h成管。建议第一次实验时,每4个小时观察一次。长沙生物医学实验外包公司慧登生物实验室提醒,成管时间取决于培养基中血管生成因子的浓度,肿瘤条件培养基中血管生成因子较丰富,容易成管,而基础培养基成管时间较久。如果使用原代内皮细胞而非永生化细胞,开始成管的时间会延迟几个小时。 好了,关于血管生成实验的一些问题就说这些了,当然,如果大家还有不明白的或者是需要实验协助指导的,可以直接咨询长沙生物医学实验外包公司慧登生物实验室哦,24小时免费咨询! |
